《TOP特约评论》栏目立足于癫痫领域前沿研究，并邀知名专家/一线临床医生分享精彩见解，旨在更好的传递癫痫领域最新学术动态、服务国内患者，助力领域发展。
本期《TOP特约评论》，我们邀请到了广西妇幼保健院儿科冯*坛主任医师及广州市妇女儿童医疗中心神经康复科李志斌副主任医师，针对一项评估靶向大规模测序（MPS）在癫痫性脑病诊断中的应用的研究进行点评。
TOP特约评论员
专家按姓氏拼音为序
癫痫性脑病（EE）是一类难治性癫痫病症，通常发病于婴儿期或幼儿期，伴有异常脑电图、严重的认知和行为障碍。近期有研究显示，在36个月（年龄）前发病的儿童癫痫患者中，有三分之一为难治性；在24个月（年龄）前发病的患者中有36%为癫痫性脑病。
在临床实践中，评估控制不佳的婴儿和儿童癫痫仍然是一个挑战。尽管有些遗传性脑病具有独特的电临床特征和合并症，但是大量癫痫性脑病患者没有与特定癫痫综合征匹配的表型，导致临床诊断不明确。随着先进分子诊断技术的出现，越来越多的癫痫性脑病相关基因被发现，基因特异性表型也得到了扩大，鉴定潜在的致病基因将有助于诊断。
该研究通过EE面板回顾本机构MPS（大规模并行测序）经验，强调了临床分类和表型分析的重要性，并阐述了EE面板测试可带来的临床获益。
研究设计
? 该研究回顾性分析了在年1月到年9月间，在Westmead医院（CHW）通过MPS进行EE面板测试的癫痫患者。
? 患有持续癫痫发作、持续异常脑电图、未找到致病原因的患者优先进行EE面板测试；排除大脑皮质畸形、CGH微阵列上的病原性拷贝数变异体的患儿。对癫痫发作前后电临床综合征、癫痫发作类型、发病年龄、神经学异常、发育迟缓、脑电图和MRI结果等临床细节进行了回顾。
? 使用GraphPadPrism软件版本6组成图表。根据数据分布的正态性，用Fisher精确检验比较分类变量，用MannWhitney检验和两个样本T检验比较连续变量。使用单变量回归模型分析临床参数（癫痫发作年龄和电临床综合征），以预测接受EE面板测试的患者中是否存在致病性变异。
研究结果
? 共计例患者进行了EE面板测试，其中，结果有效的有例。
? 致病性变异的发生率为28.5%（n=30/）：发病3个月时最高，其中Ohtahara综合征（52%，n=10/19）最高，全面性癫痫发作（0/17）最低。
? 与无致病基因突变的患者相比，有致病突变的患者癫痫发作的时间较早（3.6月vs.1.1年,P0.，OR值为0.6/年，P=0.02）。
? 在例患者中，37例（35.2%）有47个基因组、68例（64.8%）有71个基因组，每种基因的致病性变异情况见图1。
图1出现致病性变异基因的患者数目
? ALDH7A1（2）、CACNA1A（1）、CDKL5（3）、FOXG1（2）、GABRB3（1）、GRIN2A（1）、KCNQ2（4）、KCNQ3（1）、PRRT2（1）、SCN1A（6）、SCN2A（2）、SCN8A（2）、SYNGAP1（1）、UBE3A（2）和WWOX（1）基因中发现了致病性变异/可能的致病性变异。
? 不同电临床综合征经EE面板测试，鉴别出的致病性变异/可能的致病性变异存在差异，较高的有BNE（良性新生儿癫痫，n=3/3）、EOEE（早发性癫痫性脑病，包括OS，10/19，52%）、DS（Dravet综合征，n=6/10，60%），见图2。
图2不同电临床综合征中致病性变异/可能的致病性变发生情况
? 与传统研究方法相比，早期在具有明确致病变异的患者中使用EE面板测试进行病因评估的平均成本较低（澳元vs.澳元;P=0.02）。
研究启示
凭借先进的遗传技术和较低的成本，MPS越来越多地应用于临床实践。靶向MPS检测是一种全面、经济的检测方法，可以对EE患儿进行早期基因诊断。使用EE面板测试，在7个月时即可获得基因诊断，将有助于患者避免进一步检查。其中，有些患者患有局灶性癫痫/痉挛，诊断结果与潜在的结构性病因相一致，可能需要术前评估和遗传诊断。本文建议，MPS与其他检查手段共同用于儿童难治性癫痫，既能节省成本，又能减少诊断时间。
该研究中28.5%的患者（30例/例）经EE面板测试得到了确诊，至少有三分之一的患者降低了检查费用。因此，尽早使用EE面板测试能够节约成本、避免诊断延误，进而能够改变难治性癫痫患者的临床路径。此外，详细的临床分类、筛选发病较早的EE患者可以最大限度地提高EE面板测试的成功率。
尽管EE面板是全面的，但是该面板并未覆盖与家族性局灶性癫痫、特发性全面性癫痫相关的一些基因，以及TrueSightOne平台上无法获得的EE基因，还需要定期更新面板以便发现新的基因。
医脉通编译自：KothurK,etal.Diagnosticyieldoftargetedmassivelyparallelsequencinginchildrenwithepilepticencephalopathy.Seizure.Jul;59:-.
TOP特约评论
以下评论按专家姓氏拼音为序
癫痫性脑病是一组疾病的总称，难治性的癫痫发作及严重的脑电图异常放电导致精神运动发育迟滞或倒退，给家庭及社会带来很大的精神及经济负担。而且其临床类型多样，诊断较为困难。
目前的研究已证实，大多癫痫性脑病，如大田原综合征、早期肌阵挛癫痫性脑病、West综合征、Dravet综合征、Lennox-Gastaut综合征等都与患者的基因突变相关。因此，基因检测对癫痫性脑病的诊断有着重要的意义。
近年来基因检测技术发展快速，特别是二代测序技术的广泛使用，更是增加了癫痫性脑病突变基因的检出率。但是二代测序技术用于全基因组测序比较昂贵、耗时，并且庞大的数据分带给实验工作者带来巨大的挑战。
与第一代测序技术、基因芯片技术、高通量测序技术相比，靶向大规模并行测序技术在准确性、经济性、高效性等方面均有一定的优势，它不仅可以检测常见的已知致病基因，降低漏诊率，并为发现新的致病基因提供了有效手段。该研究运用靶向大规模并行测序技术对癫痫性脑病患者进行检测，检测到了有意义的致病基因，同时既能节约成本、减少诊断时间，也降低了患者的检查费用，有利于患者的早期治疗。因此该技术值得在临床工作中推广应用。
冯*坛，广西妇幼保健院儿科神经电生理室主任，主任医师，同时担任中国抗癫痫协会青年委员会委员、广西医学会儿科学分会委员等职务。擅长神经系统疾病尤其睡眠障碍、癫痫、抽动症等疾病的诊治。主持1项广西卫生计生委科研课题，并参与中国疾病预防控制中心妇幼保健中心科研项目、广西自然科学基金项目等多项课题。先后在国家级省级核心期刊发表论文10余篇，SCI论文1篇。
癫痫性脑病(EE)是由癫痫性活动（包括临床频繁的癫痫发作以及发作间期脑电持续的痫性放电）引起的进行性脑功能障碍，病因复杂。随着现代科技发展，部分获得性脑损伤、脑结构异常、遗传代谢性疾病的患者通过血生化检测、头颅影像学检查、代谢病筛查可以获得正确诊断，但仍然有接近半数的EE病因不明。
近年来的文献提示，原因不明的EE与基因突变及拷贝数变异密切相关。但由于这类患儿无明确对应的基因型-表型关系，且同一个基因突变可以有多种临床表型，增加了诊断的难度。
基因检测可以辅助确诊EE，并且目前在部分EE中可以根据不同的基因突变进行针对性治疗，因此，在对癫痫表型深入认识的前提下，我同意尽早使用基因检测，可以节约遗传病诊断的成本，确定病因。
考虑到检测成本，基因panel可以检测内含子区域并且深度较深，在CNV分析中存在一定优势，但是我们并没有对EE在基因层面有深入的认识，不排除未来发现新致病基因的可能，基因panel选择的基因列表可能不全会导致漏诊，因此，目前癫痫领域基因检测也越来越多采用全外显子测序的方案，通过改进生信算法可以弥补全外深度相对较低的不足。在成本相当的情况下，全外可以得到所有基因的检测结果，适合持续解读，并且随着测序成本的逐渐下降，在可见的未来，全外甚至全基因组在临床将更为普及。
李志斌，广州市妇女儿童医疗中心神经康复科副主任医师，同时担任广东省抗癫痫协会理事，主要擅长于小儿癫痫、脑瘫、多动症、抽动症、儿童行为障碍、中枢神经系统感染及小儿神经系统疾病危重症等疾病的诊治。
特约评论内容仅代表专家个人观点
预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇